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Stereo-seq分析流程软件包(Stereo-seq Analysis Workflow, SAW)整合了多个Stereo-seq空间组基因表达分析工具,这些工具可用于还原以及可视化测序数据在芯片上的空间表达信息。Stereo-seq原始测序数据经SAW分析后,得到可以用于下游分析的空间表达矩阵。
主要功能:
1. 图像预处理
基于track线对显微镜的小图文件进行拼接,同时也会进行初步组织分割和细胞分割。
2. 数据过滤
对低质量的序列、无法比对到CID序列、无法比对到外显子区域序列、多比对序列以及重复序列分别进行严格过滤筛选。
3. 获取表达矩阵
经过数控的序列最终根据比对信息,生成基因表达矩阵,同时也会生成不同bin下的表达矩阵的表达矩阵。
4. 图像配准与组织分割
分割非组织覆盖区域的基因表达数据,去除背景噪音。通过图像配准以及组织分割,最终可准确保留下组织区域的表达信号。
5. 空间聚类
该模块基于组织分割得到的表达矩阵进行细胞无监督聚类,展示不同的细胞类型在空间上的分布。
SAW流程图
SAW流程生成的分析报告